Term
| Hoe werkt fluorescence-activated Cell sorting (FACS) |
|
Definition
Cellen aangekleurd met fluorescent gelabelde antilichamen die binden aan celtype specifieke receptoren.
cellen gaan door een laser.
fluorescent molecules are - charged
nonfluorescent are + charged
combination of those two have no charge
[image] |
|
|
Term
| Hoe werkt somatic nuclear transplantation |
|
Definition
- nucleus from unfertilized egg is removed
- Adding of adult tissue cell
- cell division
- reproductieve cloning or therapeutic cloning |
|
|
Term
| Noem 4 eigenschappen van klonen |
|
Definition
- sterven voortijdig
- geen 100% kloning (mitochondrion DNA)
- klonen vertonen groot aantal genetische defecten
- genen hebben afwijkend expressie-patroon |
|
|
Term
| Hoe werkt monoclonal antibody production? |
|
Definition
- Mouse immunized with antigen
- Mouse makes antibodies
- Mutant cell line from tumor is fused with the antibodies
[image] |
|
|
Term
| nadat er hybridoma cellen zijn gemaakt moeten deze gesorteerd worden. hoe gaat dit? |
|
Definition
- medium waarin alleen hybridoma cellen kunnen leven
- Daarna testen voor anti-x antibody productoin from positive well cultured at 1 cell per well.
- positive clones provide a continuing source of anti-x antibody |
|
|
Term
| Hoe werkt specifieke detectie van DNA |
|
Definition
Dit via hybridisatie probes
- single stranded DNA probes for gene A
- + mixture of single stranded DNA molecules
hybridization
afhankelijk van
- temperatuur
- zoutconcentratie
- basenvolgorde |
|
|
Term
| hybridizatie kan ook via northern en southern blotting. hoe werkt dit? |
|
Definition
via gel electroforese DNA gescheiden op grootte en lading.
Toevoegen van single stranded labelled DNA.
Daarna hybridizeren.
[image] |
|
|
Term
| Hoe kan je een DNA fragment clonen? |
|
Definition
| dit dmv circular double-stranded plasmid DNA. Cleavage with restriction nuclease - Covalent linkage of DNA fragment to be cloned by DNA ligase [image] |
|
|
Term
| Hoe werkt de amplificatie van plasmide DNA? |
|
Definition
Double stranded recombinant plasmid DNA inserted in bacterial cell -> culture
[image] |
|
|
Term
|
Definition
- double stranded DNA
- heat to seperate
- hybridization of primers
- add DNA polymerase, dATP, dGTP, dCTP, dTTP
- DNA synthesis from primers |
|
|
Term
| Met PCR kan een DNA strand meerdere keren verdubbeld worden ofwel clonen. welke twee manieren van clonen heb je? |
|
Definition
- genomic clones : vanuit DNA
- cDNA clones : from mRNA |
|
|
Term
| Waar worden plasmiden voor gebruikt? |
|
Definition
- cloneren
- maken van bibliotheken
- RNA productie
- eiwit productie |
|
|
Term
| Leg de werking uit van PCR en diagnostiek van infectieziekte |
|
Definition
- Blood from person
- Remove Cells
- Rare HIV particle in plasma
- Extract RNA
- Reverse transcription
- amplification PCR
- Gel electrphoresis
- compare with control
[image] |
|
|
Term
| Leg uit hoe DNA dideoxysequencing werkt |
|
Definition
- dsDNA -> single stranded DNA
- add labeled primer
- excess dATP,TTP,CTP,GTP
- 4 verschillende potjes, elk met een andere gekleurde dXTP.
- add polymerase
- Gel electrophorese
[image] |
|
|
Term
| Hoe werkt geautomatiseerde dideoxy sequencing? |
|
Definition
- mixture of DNA products, each containing terminating ddNTP labeled with different fluorescent marker
[image] |
|
|
Term
| Hoe werkt next generation sequencing? |
|
Definition
- random fragmentatie DNA
- Toevoeging DNA adapter sequences door DNA ligase
- Direct gesequenced en geamplifificeerd tot een cluster van identieke sequenties
- detectie van sequentie vindt plaats tijdens polymerisatiereactie
- resulteert in kortere sequenties met meer fouten |
|
|
